多肽固相合成（SPPS）和長肽合成的混合技術

多肽固相合成是當今 流行的多肽合成方法。C端的前面一個氨基酸被耦合在活化的載體（如聚苯乙烯）上。樹脂既可作為c端保護基，同時又可將增長的肽產品從在合成過程中形成的反應混合物中快速分離出來。

我們經常有客戶對超長多肽的合成咨詢，比如長度在100到200個氨基酸的長肽的合成，其實200個氨基酸已經是屬于蛋白質的范疇了。成功合成169個氨基酸的蛋白證明我們的合成技術在現(xiàn)有的技術平臺是完全能勝任長肽的合成的，我們的技術平臺PeptideSyn通常都是合成50個氨基酸以下的多肽，但是通過我們對多肽鏈接技術的改造和針對長肽的 ，我們現(xiàn)在能成功合成蛋白質長度的多肽。

通過化學合成的辦法獲得長達100到200個氨基酸的蛋白，比其它方法相比要跟快捷和便宜，況且化學合成的蛋白是按照氨基酸的順序來進行的，不會出現(xiàn)錯誤或者變異的情況。化學合成還能加入一些別的辦法不能進行的修飾，比如取代常規(guī)氨基酸為D型氨基酸，增加某個位點的磷酸化或者甲基化?；瘜W合成還不需要額外增加純化蛋白用的標簽比如6HIS或者FLAG等。在蛋白表達的方法上，反而是基因合成，質粒構建，蛋白表達和純化等工作占據(jù)了絕大多數(shù)的時間和成本。因此長肽的化學合成方法是廣大科研工作值得嘗試的途徑。

固相合成和混合技術策略

優(yōu)勢

• 長肽被快速合成：Fmoc/Boc法
• 生產周期短
• 工藝自動化和高效性
• 沒有需分離的中間體

• 原料成本高，易造成原料浪費。
• 雜質較復雜：包括有插入、截斷、刪除、被修改或未被修改的氨基酸。

成功案例 1

成功的在四周內合成了一個169個氨基酸的多肽 (M.W. 18716.41, 83% purity)。多肽合成的成功率取決于多肽的序列，有時候150個氨基酸的多肽有時候比一個70個氨基酸的多肽更容易合成。通常利用Boc/Bzl進行氨基酸的保護對于長的多肽會比較有幫助，由于多肽產品的切割需要比較強的酸比如TFMSA和HF，所以在去保護的時候有些有活性的中間產物很容易和一些氨基酸進行反應，我們對原料和酸堿的選擇能很大程度的解決這些問題，因此我們的PeptideSyn技術平臺對于長肽的合成起到了突破性的作用。

HPLC Results

Mass Spectrometry Results

成功案例 2

某客戶要求合成一高度疏水的含68個氨基酸的多肽(純度為85%)，N端進行FITC標記。此多肽在4周內成功合成。

HPLC Results

Mass Spectrometry Results