含有Cys的多肽在出貨前經(jīng)過還原了嗎?
如果沒有發(fā)現(xiàn)肽已經(jīng)被氧化,我們一般不對(duì)Cys 進(jìn)行還原。所有的多肽都是由粗品在pH2條件下純化、凍干后得到的,這樣的pH條件至少在某種程度上防止了Cys的氧化。含Cys的肽一般在pH2條件下進(jìn)行純化,除非有特殊原因需要在pH6.8條件下純化。如果純化在pH6.8進(jìn)行,純化產(chǎn)物必須馬上用酸處理以防氧化。在*后的質(zhì)量控制環(huán)節(jié),對(duì)于含有Cys的肽,如果MS 圖譜上發(fā)現(xiàn)有分子量為(2P+H)的物質(zhì)存在,說明已形成二聚體。如果MS和HPLC都沒有問題,我們就直接凍干后出貨,無須再做任何處理。需要指明的是,含有Cys的肽隨著時(shí)間的推移會(huì)發(fā)生緩慢的氧化,氧化程度主要取決于肽序列及貯存條件。