多肽是如何純化的?

多肽純化一般使用反相柱(如C8，C18等)，214nm。緩沖體系通常為含TFA的溶劑，pH2.0。Buffer A為含0.1%TFA in ddH2O，Buffer B為1%TFA/ACN/pH2.0。純化前用Buffer A溶解;如果溶解不好，用Buffer B溶解后，然后用Buffer A稀釋;對(duì)疏水性強(qiáng)的多肽，有時(shí)還需要加入少量的Formic Acid或醋酸。HPLC分析多肽粗產(chǎn)物，如果多肽不長(zhǎng)(15aa以下)，一般會(huì)有主峰，主峰通常為全長(zhǎng)產(chǎn)物;對(duì)于20aa以上的長(zhǎng)肽，如果沒(méi)有主峰，HPLC需搭配Mass來(lái)判定分子量，進(jìn)而確定哪個(gè)峰是所要合成的多肽。